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實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證和室間比對(duì)活動(dòng)是判定實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力的重要手段之一，不但可以提高實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力和技術(shù)水平，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)和質(zhì)量管理上存在的問(wèn)題，還能增加客戶以及相關(guān)方對(duì)實(shí)驗(yàn)室的信任。
今天小編和大家一起來(lái)看看微生物能力驗(yàn)證注意事項(xiàng)有哪些：
1、操作前仔細(xì)閱讀參指導(dǎo)書(shū)，關(guān)鍵是小的備注要注意，很多特殊情況的處理大都在備注里。
2、樣品接收前的檢查很重要，首先對(duì)樣品的完整性進(jìn)行檢查，對(duì)信息的閱讀要全面，如果發(fā)現(xiàn)樣品有問(wèn)題及時(shí)溝通，這樣要比做樣品的時(shí)候在發(fā)現(xiàn)來(lái)的要及時(shí)，能節(jié)省不少的時(shí)間；
3、作業(yè)指導(dǎo)書(shū)的閱讀要到位，很多能力驗(yàn)證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，作業(yè)指導(dǎo)書(shū)中往往會(huì)對(duì)本次能力驗(yàn)證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項(xiàng)等有明確的規(guī)定，熟讀這些對(duì)試驗(yàn)準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會(huì)要求將試驗(yàn)后樣品一塊寄發(fā)組織單位，有的實(shí)驗(yàn)室如果不仔細(xì)閱讀的話很容易將測(cè)試后樣品立即處理掉，如果寄樣時(shí)在看見(jiàn)可就完了。
4、測(cè)試前的準(zhǔn)備工作一定要做好，包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運(yùn)行等，有條件的情況下可以在正式測(cè)試前選擇一塊相仿的樣品進(jìn)行一下預(yù)測(cè)試，這樣會(huì)將測(cè)試過(guò)程中的問(wèn)題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對(duì)正式測(cè)試的操作有幫助。
1、樣品測(cè)試過(guò)程中的判斷能力很重要，有時(shí)候我們?cè)跍y(cè)試中往往會(huì)自以為是，為了保證測(cè)試過(guò)程中的準(zhǔn)確操作最好是找一個(gè)經(jīng)驗(yàn)豐富的作督察，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)解決，如果等操作完畢再發(fā)現(xiàn)問(wèn)題的話可能會(huì)因?yàn)闃悠返南亩鵁o(wú)法驗(yàn)證結(jié)果；
2、定量項(xiàng)目，西林瓶?jī)?nèi)樣品不可分割，應(yīng)全部用于檢測(cè)。一般參考書(shū)指導(dǎo)的是加40mL稀釋液制成40mL樣品。
3、定量項(xiàng)目樣品稀釋。指導(dǎo)書(shū)標(biāo)明了稀釋范圍的，在稀釋范圍左右各加1個(gè)稀釋度進(jìn)行；書(shū)上沒(méi)有稀釋范圍的，多做稀釋倍數(shù)，選擇合適的稀釋倍數(shù)計(jì)數(shù)（一般可稀釋至10-8）。
4、定量項(xiàng)目，除了要多做稀釋倍數(shù)外，同時(shí)同一稀釋度要多倒幾皿，從原理上來(lái)講，檢測(cè)過(guò)程屬于隨機(jī)抽樣檢查，平板越多，數(shù)據(jù)越接近真值?？紤]性價(jià)比，又不可能一直一個(gè)稀釋度很多平板，所以能力驗(yàn)證時(shí)候多倒幾皿，求好結(jié)果。
5、定性項(xiàng)目有一些重要步驟：
a、增菌及分離步驟尤其重要。選擇合適的增菌液和分離用培養(yǎng)基對(duì)目標(biāo)菌的檢出非常關(guān)鍵，選擇兩種以上的增菌液和分離用培養(yǎng)基對(duì)菌株作直接分離和增菌后分離。
b、劃線分離十分重要，要把增菌液中的目標(biāo)菌盡量多的表達(dá)出來(lái)，要分出單個(gè)菌落并盡可能多挑取可疑菌落，確保分離到目標(biāo)菌。
c、生化試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)以營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上的純培養(yǎng)細(xì)菌為好。
陽(yáng)性對(duì)照，是在試驗(yàn)中，檢驗(yàn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合，如果在實(shí)驗(yàn)中，陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)沒(méi)有生長(zhǎng)的話，那這個(gè)實(shí)驗(yàn)是失敗的。陰性對(duì)照主要是檢測(cè)培養(yǎng)基是否污染，在沒(méi)有加入任何東西培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會(huì)顯示陽(yáng)性結(jié)果，這就說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不夠，染菌了，這樣也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的。
1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌
正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝螅偌尤胧Ｓ嗨?，混勻后滅菌或分裝。
一定要用震蕩器充分混勻水化液，作為檢測(cè)原液，普通手搖混勻與經(jīng)震蕩器混勻的樣品液，計(jì)數(shù)結(jié)果相差較大?；靹蚝蟮臉悠穱?yán)格按照指導(dǎo)書(shū)規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行檢驗(yàn)。
2、混菌法倒皿要充分混勻
培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈（混勻速度一定要慢，目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染），找較水平位置冷卻凝固。
3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問(wèn)題
覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過(guò)鞭毛移動(dòng)，造成片狀生長(zhǎng)，無(wú)法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對(duì)于不運(yùn)動(dòng)的菌，可以不覆蓋，對(duì)于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。
總結(jié)一下
a.長(zhǎng)期檢測(cè)同一種樣品，不覆蓋并無(wú)蔓延現(xiàn)象，不覆蓋；長(zhǎng)期檢測(cè)蔓延選擇了覆蓋，一直覆蓋。
b.未知樣品，進(jìn)行覆蓋和不覆蓋的比對(duì)實(shí)驗(yàn)，然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗(yàn)。
c.能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，覆蓋和不覆蓋的都做，不要吝惜那么一點(diǎn)點(diǎn)培養(yǎng)基或耗材，畢竟能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做的漂亮才是實(shí)驗(yàn)室（是室而不是人！）能力的綜合體現(xiàn)。
4、 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過(guò)程勤觀察
微生物培養(yǎng)過(guò)程一般需要幾小時(shí)到幾十小時(shí)，要利用這段時(shí)間觀察培養(yǎng)箱及菌生長(zhǎng)情況，比如溫度是否穩(wěn)定，培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等，多思多看，準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗(yàn)的全過(guò)程,原始記錄要包含檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)現(xiàn)象、檢測(cè)結(jié)果三個(gè)要素，方便檢測(cè)出現(xiàn)問(wèn)題的溯源。
結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作，但是對(duì)于人為操作如評(píng)級(jí)、手工操作等結(jié)果可能會(huì)因?yàn)槿藛T的差別而會(huì)有不同的偏差，這樣在判定時(shí)最好是找有經(jīng)驗(yàn)的部門負(fù)責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪，這樣的話會(huì)減少很多不必要的錯(cuò)誤。
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